颞叶癫痫（TLE）是最常见的癫痫类型之一，其特征为反复发作的癫痫发作，给患者及其家庭带来了显著的生理和心理负担。尽管现有的抗癫痫药物（ASMs）在控制癫痫发作方面取得一定效果，但无法阻止癫痫的发展，并可能导致药物抵抗性。最近，发表在《EMBOMolecularMedicine》杂志上的一项研究论文，标题为“基于一氧化氮供体的新型颞叶癫痫抗癫痫发生策略”，为我们提供了一种全新治疗方案——利用一氧化氮（NO）供体来预防和治疗颞叶癫痫。

研究背景

在颞叶癫痫患者中，高达70%可能最终发展为药物抵抗性癫痫（DRE），这表明他们对临床上使用的抗癫痫药物没有反应。这些患者通常需要进行外科手术切除，但手术并非总是有效，并伴随风险。因此，迫切需要探索新的治疗方法。

研究结果

研究人员发现，在TLE患者及小鼠的致痫海马区域，nNOS-NO水平显著下降。MRI图像显示患者存在左侧海马硬化，脑电图记录揭示频繁的癫痫放电，立体脑电图进一步确认海马为癫痫发作的焦点。RNA测序分析表明，药物难治性癫痫患者的nNOS基因表达显著降低，随后通过RT-qPCR和western-blot实验进一步验证了这一发现。此外，免疫荧光染色显示nNOS阳性中间神经元的丢失是nNOS表达下降的主要原因。

为了探讨海马nNOS缺乏是否在癫痫病理中占据关键角色，研究人员建立了一种特别的小鼠模型，通过选择性敲除海马齿状回内神经元中的神经型一氧化氮合酶（nNOS, 由Nos1基因编码）模拟颞叶癫痫。实验结果显示，与对照野生型小鼠相比，nNOS敲除小鼠在接受不同剂量匹鲁卡品后，癫痫发作的累积评分明显更高，显示出明显的癫痫敏感性。此外，脑电图记录显示，nNOS缺失小鼠在海马齿状回区域自发产生癫痫样尖峰放电，表明癫痫活动可能源于此。

nNOS在TLE中的特定作用

进一步确认nNOS在TLE中的特定作用，研究人员选择性从海马门区内神经元中敲除了nNOS，而不是从齿状颗粒细胞（DGCs）中。这一操作已足以诱发癫痫发作。研究中通过CRISPR/Cas9技术构建了Nos1条件性敲除（cKO）小鼠模型，并通过AAV病毒介导的Cre表达精确地在GABA能中间神经元中删除了nNOS。结果表明，仅在海马门区内神经元中敲除nNOS就足以导致癫痫发作，而不影响其它类型的神经元。此外，这种敲除导致DGCs的异常兴奋性输入回路形成和过度兴奋。

为了确定观察到的癫痫发生是否与nNOS缺乏导致的海马DGCs的传入输入过多有关，研究人员使用狂犬病毒追踪系统确认nNOS缺失导致DGCs与其他神经元之间的异常连接，从而引发癫痫样活动。这一发现强调了nNOS在维持正常神经回路功能中的重要性。

NO供体作为治疗新途径

Nos1−/−小鼠对匹鲁卡品诱发的SE的易感性可能由海马DG中兴奋性神经元的癫痫样高兴奋性传入回路的过度激活引起。研究发现，nNOS缺失小鼠的DGCs中cFOS阳性细胞数量显著上升，表明这些细胞的活跃性增强。此外，通过全细胞膜片钳记录，观察到nNOS缺失导致DGCs的兴奋性突触传递增强，表现为小型兴奋性突触电流（mEPSCs）频率显著提高，而抑制性突触传递未受到影响。这些结果表明，nNOS缺失导致DGCs的过度兴奋，可能是癫痫发生的重要机制之一。

通过慢病毒载体补充nNOS能够逆转匹鲁卡品诱导的TLE小鼠模型中nNOS蛋白含量和一氧化氮（NO）浓度下降。更重要的是，脑电图记录显示，这种补充阻止了慢性癫痫的发展。此外，长期给予DETA/NONOate——一种具有长半衰期的外源性NO供体，成功阻断了TLE小鼠模型中过度兴奋性传入回路的形成，并显著抑制癫痫发作的发展。这一实验结果表明，NO供体治疗不仅能够预防TLE病理发展，还有助于解决对现有药物无反应的患者的治疗需求，彰显了918博天堂在生物医疗领域的变革潜力。

综上所述，这项突破性的研究为我们提供了颞叶癫痫治疗的新视角。通过调节一氧化氮水平，我们或许能够开发出更有效的治疗手段，帮助那些对现有药物无反应的患者。此研究不仅为现有治疗方法的补充，也为癫痫治疗领域带来了重大突破，值得918博天堂关注和持续研究。

作者简介：南京医科大学药学院临床药理学教研室周其冈教授、孟帆副教授及南京医科大学附属医院神经外科黄保胜副教授为本文共同通讯作者。同时，朱贤慧硕士、周亚萍硕士、张乔硕士、朱明仪硕士为共同第一作者。